重组蛋白的表达生产服务

一、糖蛋白

       糖蛋白是含糖的蛋白质,由肽链中的一定氨基酸残基和寡糖链与以糖苷键共价连接,是蛋白翻译后通过糖基化修饰而成。受体蛋白、肿瘤细胞表面抗原等均属糖蛋白。很多蛋白药物包括抗体药物,都需要经过糖基化修饰后才会有生物活性,这些糖基化常常会影响蛋白药物的有效性、半衰期、免疫原性等。糖蛋白在生物体内发挥着极其重要的作用,是未来生物医学科研和生物制药的重要研究目标。用哺乳动物细胞尤其是人源细胞来高效表达和生产具有天然结构的糖蛋白,具有极大的挑战性,但却是生物医学科研和药物研发成功的重要保证。

      我们公司的哺乳动物细胞表达体系具有中国仓鼠卵巢(CHO)和人胚肾细胞(HEK 293)改良细胞株,以及配套的高效的真核表达载体,不仅能够保证所表达的糖蛋白的天然折叠结构和糖链组成,而且能够使糖蛋白的表达水平得到显著提高,根本解决重组糖蛋白的糖基人源化问题。

(1) 具有自主构建的高效表达载体,可实现高效分泌表达,利于重组蛋白的纯化与检测:

  • 载体自带的信号肽帮助蛋白穿膜分泌至胞外,该信号肽是用生物信息学方法,归纳推演出的分泌能力最强的人工信号肽,大大促进分泌蛋白(例如抗体)的表达。
  • 基因沉默是获得高表达细胞株的主要限制因素。本公司自主构建的高效表达载体中在启动子上游和PolyA下游分别添加自主知识产权的AGE (Antagen Genetic Element) 元件保护目标基因,可屏蔽染色体基因沉默(gene silencing)。

 (2) 具有高效表达的改良细胞株,有助于重组蛋白高效表达: 细胞株是重组蛋白表达的关键因素。除具有成熟的高效表达载体外,安泰吉公司通过基因编辑技术,插入糖基化的元件或者敲除糖基化的基因,对宿主CHO和HEK 293细胞进行改造,从而改善目标蛋白的糖基化类型。

(3) 丰富的蛋白表达经验,提供优化的蛋白表达方案:本公司的技术团队拥有丰富的CHO及HEK 293细胞表达经验,同时具有配套的蛋白设计分析服务以及表达方案,如优化基因序列密码子、选择合适的信号肽、选择合适表达细胞以及转染筛选方法等等,进而改造重组蛋白糖基化以及提高糖蛋白表达的成功率和产量。

     我公司的专业经验以及高效蛋白表达体系,为您提供从方案设计、基因优化、表达条件优化到纯化的技术体系和专业服务。
 

我们的优势

1.一站式服务:从载体构建到糖蛋白纯化,为您解决所有问题;

2.合格的细胞株:保证表达糖蛋白的质量;

3.节省时间: 选择具有快速生长和高效转染的HEK293 FT细胞,快速的载体构建策略、糖蛋白表达分析技术、细胞培养和糖蛋白纯化方法,为您节约时间成本;

4.高表达水平:通过在载体序列(具有极强分泌效果的信号肽、表达基因序列的密码子优化、分子量小的载体、可在染色体外复制的载体等)、转染方法和细胞培养等方面,显著提高糖蛋白表达的产量;

5.高质量的糖蛋白:使用亲和纯化、透析和超滤等方法,最大限度保证糖蛋白的活性;

6.高成功率:在我们的哺乳动物表达系统中已经成功表达多个糖蛋白;

7.大规模生产:通过悬浮培养,可获得数克级糖蛋白;

8.解决糖蛋白表达量低的问题:通过优化基因序列密码子,以使糖蛋白表达尽可能增加;选择合适的信号肽使糖蛋白分泌到细胞外,以减少对细胞正常生理活动的影响;在不影响糖蛋白功能的前提下,通过生物信息学的策略,对基因序列进行突变,以减少糖蛋白的聚集,进而提高产量;

 

二、重组蛋白(难表达)

 

        利用哺乳动物细胞制备或生产具有完整功能活性的重组蛋白及抗体在蛋白结构功能研究及生物制药,特别是治疗性重组单抗药物的研发和生产中有最为广泛的应用。

      我公司可以提供蛋白表达服务,利用中国仓鼠卵巢细胞(CHO细胞),人胚胎肾细胞293(HEK293细胞)等细胞可以获得最接近于天然状态的翻译后修饰、折叠和聚合,具备活性蛋白所必须的空间结构和功能,在活性方面远胜于原核表达系统及酵母、昆虫细胞等真核表达系统。

      根据不同的需求,我公司的瞬时表达服务和稳定细胞株表达服务可为您定制化生产不同要求的重组蛋白及抗体,同时为您提出抗体及蛋白设计建议,结构域选择,标签选择等一系列个性化服务,提供从基因合成到蛋白表达、纯化等一体化全程无忧服务,客户可以自由选择不同的细胞株和不同的表达方式,进而选择不同的表达规模(30ml-1L)及表达量。

      根据不同蛋白的性质,我公司蛋白可通过和层析,离子交换层析,凝胶过滤层析,疏水层析等方法纯化获得目标蛋白。蛋白检测方式包括SDS-PAGE(十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳)或Native-PAGE(未变性聚丙烯酰胺凝胶电泳)检测,蛋白浓度测定,Western blotting检测,质谱分析,活性检测等多种方式。

 

详情链接:http://www.antagenbeijing.com/cn/uneasily-produced-recombinant-proteins